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光學(xué)顯微鏡物鏡參數(shù)解讀

更新時間:2019-06-18點擊次數(shù):34092

1.放大倍數(shù):物鏡上行數(shù)字中的“10”和“4”表示物鏡的放大倍數(shù)為10倍或4倍,這里放大倍數(shù)不是面積的放大倍數(shù),而是指像的長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù),且顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。

2.分辨率:分辨率是指所能分辨兩個物點間的小距離。顯微鏡的分辨距離越小,表示它的分辨率越高,也就是表示它的性能越好。顯微鏡的分辨率大小是由物鏡的分辨率來決定的,而物鏡的分辨率則由它的數(shù)值孔徑(鏡口率)和照明光線的波長決定的。當(dāng)光線均勻地透過標(biāo)本時,顯微鏡的分辨距離可用公式:D=0.61λ/NA(D表示物鏡的分辨距離,單位nm;λ表示照明光線波長,單位nm; NA表示物鏡的數(shù)值孔徑) 表示,所以顯微鏡的分辨率與數(shù)值孔徑成正比。(D值越小,分辨率越高)

3.數(shù)值孔徑( 鏡口率):物鏡中“0.25”和“0.10”分別為兩個物鏡的數(shù)值孔徑,它表示物鏡的前透鏡收集來自樣品光線的能力,數(shù)值孔徑的大小可用公式NA=Nsinα,其中N表示介質(zhì)的折射率,空氣中N=1,而在油鏡下,N 可提高到1.5;α表示物鏡孔徑半角( 圖2) ,物鏡孔徑半角越大,進(jìn)入物鏡的光線就越多。

4. 機(jī)械鏡筒長: 圖1物鏡上的“160”即指該物鏡必須在機(jī)械鏡筒長度為160mm的顯微鏡上才能使用。由物鏡定位面至目鏡定位面的距離為160mm,該距離稱為機(jī)械筒長,即取下物鏡和目鏡以后,所剩下的鏡筒長度。各國對機(jī)械筒長的規(guī)定不同,主要有160mm、170mm 和190mm 等幾種。

5.蓋玻片厚度:上規(guī)定,蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為0.17±0.01mm。圖1物鏡上所標(biāo)記的數(shù)字“0.17”即表明該物鏡要求蓋玻片的厚度為0.17mm,若蓋玻片的厚度大于0.18mm時,雜光( 不是反光鏡反射的光) 就會進(jìn)入物鏡,從而產(chǎn)生相差,當(dāng)蓋玻片的厚度小于0.16mm 時,應(yīng)該進(jìn)入物鏡的光線不能進(jìn)入物鏡,進(jìn)而也產(chǎn)生相差影響觀察效果。另外,由于香柏油與玻璃的折光率相近,所以油鏡物鏡不存在蓋玻片厚度不規(guī)范引起的相差問題,也就是說蓋玻片的厚度對油鏡物鏡觀察效果影響幾乎可忽略不計,在有、無蓋玻片的情況下都可以使用( 如血涂片) 。所以,有的油鏡上不標(biāo)“0.17”而代之以橫線“-”。

6.工作距離:工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。

總結(jié)一下:如圖,圖中四個數(shù)據(jù)的含義分別是:

①物鏡上行數(shù)字中的“10”和“4”表示物鏡的放大倍數(shù)。

②物鏡中“0.25”和“0.10”分別為兩個物鏡的數(shù)值孔徑,即鏡口率,它與顯微鏡的分辨率有關(guān),數(shù)值越大分辨率越高,也就是表示它的性能越好。

③物鏡上的“160”稱為機(jī)械筒長,指物鏡定位面至目鏡定位面的距離為160mm,即取下物鏡和目鏡以后,所剩下的鏡筒長度,表示該物鏡必須在機(jī)械鏡筒長度為160mm的顯微鏡上才能使用。

④物鏡上所標(biāo)記的數(shù)字“0.17”表示該物鏡要求蓋玻片的厚度為0.17mm。

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